Музей Русалки Дністрової відкритий 15 вересня 1990 року у дзвіниці колишньої церкви Святого Духа. Тоді ж встановлений пам'ятник Маркіяну Шашкевичу (скульптори Д. Крвавич і М. Посікіра, архітектори В. Дубиніна і М. Федик).

Цікавою є історія самої будівлі, де розміщений музей. Протягом 1722–1729 рр. на кошти фундаторки Теофілії Вишневецької (з Ліщинських) тут зведені костел та монастир домініканок. Після ліквідації ордену австрійською владою у 1783 р. монастир став українською греко-католицькою духовною семінарією (з 1926 р. — Богословська академія), де, зокрема, навчалися автори "Русалки Дністрової" — Маркіян Шашкевич, Іван Вагилевич та Яків Головацький. Костел у той час перебудований у храм Святого Духа. Художником церковного п'ятиярусного іконостасу був Лука Долинський, а розписами займався Модест Сосенко. Вежа храму виконувала функцію дзвіниці, де був встановлений унікальний годинник. Історія цієї реліквії сягає XVII ст., коли гетьман Іван Виговський привіз її у Манявський скит. На теперішнє місце годинник перенесений наприкінці XVIII ст. Після Другої світової війни з цілого ансамблю вціліла лише дзвіниця з бароковим завершенням. Сьогодні це пам'ятка національного значення.

У 1987 р. до західного боку добудовані музейні приміщення, майже через 20 років відновлено роботу годинника. У 2010 р. у вежі-дзвіниці розміщений уже оновлений Музей Русалки Дністрової, який є відділом Львівської галереї мистецтв.

Музей присвячений книжці "Русалка Дністрова" — першому галицькому альманаху, який був виданий у Пешті 1837 року і набув всеукраїнського філологічного значення. "Русалка Дністрова" — плід праці відомого просвітницько-літературного угрупування "Руська трійця", заснованого у 1833 р. згаданими М. Шашкевичем, І. Вагилевичем та Я. Головацьким. Про діяльність "Руської трійці" і знайомить експозиція музею. Зокрема тут представлені тематичні документи, книги, картини. На стендах демонструються рідкісні видання альманаху "Русалка Дністрова". Тут можна ознайомитися з творами М. Шашкевича. У 1838 р. вийшла у світ полемічна брошура М. Шашкевича "Азбука і Abecadlo", в якій автор виступив проти спроб впровадження латинського алфавіту в українське письменництво. Тоді ж створена перша українська читанка для дітей — у музеї можна ознайомитися з її рукописом та першим виданням 1850 року.

Музейні експонати також детально висвітлюють дослідницьку, видавничу та публіцистичну діяльність "Руської трійці". Серед них — фрагмент перекладу М. Шашкевича і В. Ганки "Плач Ярославни" та народної пісні, записаної М. Шашкевичем. Особливий інтерес викликають рідкісні видання "Русалки Дністрової": у Будимі (1837), Тернополі (1910), Києві (1987), — а також фотокопії першого видання.

Цікавим є "Родовідне дерево" Маркіяна Шашкевича. Тут також представлені рідкісні видання про життя і творчість засновників "Руської трійці".