Основою для музейної експозиції стала книгозбірня владики Варфоломія, архієпископа Рівненського і Острозького УПЦ, яку він подарував музею. Більша частина колекції — це стародруки, найстаріший з яких має більше 350 років.
Експозиція музею розташована в трьох кімнатах другого поверху будинку — архітектурній пам'ятці 1807 року у стилі ампір, де колись було повітове казначейство. У різні періоди тут розміщувалися різні державні установи. З 2010 р. другий поверх займає музейна експозиція, а на першому функціонує сувенірний магазин.
Перша кімната присвячена матеріалам, які демонструють початок та розвиток книгодрукування в Європі. Особливий інтерес викликає діюча модель-реконструкція друкарського верстату XV ст., на якому працював європейський першодрукар та вчений Йоган Гутенберг.
В наступних кімнатах представлені стародруки та пізніші друковані видання шести найвідоміших друкарень Львова, Києва, Чернігова, Вільнюса, Почаєва, Москви. Раритетні експонати — це Службове Євангеліє (Львів, 1644 р.) та двохтомний Требник Петра Могили (1646 р., виданий ще за життя митрополита).
Цікавою для відвідувачів є колекція книг-мініатюр, перші друковані ноти та колекція середньовічних гравюр.